如何确定小鼠跳台实验结束后间隔多久再进行

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跳台试验是一种基于被动回避反应的实验方法,用于评价药物对小动物学习记忆的影响。在这个实验之前,往往需要测量实验小鼠的学习能力。由于记忆形成的特点,如动物分组后立即进行正式实验,必然会对后续的训练和测试产生影响,所以需要有一个时间间隔,尽量消除分组前电刺激的影响,但没有报道时间间隔多长合适。我们测量并解释了小鼠跳台实验训练后的自然遗忘时间。

给药和测试的时机不同,以评估药物对记忆不同阶段的影响。我们的数据只对记忆巩固和再现的实验评价有一定的参考价值,对记忆的获得实际意义不大。当然,我们提供的数据只是在作者实验室条件下做出的数据结论。由于在血压降低实验中有许多影响因素,操作者和实验环境都可能影响数据。建议在正式实验前,将本实验室小鼠自然遗忘时间的测定作为预实验的重要步骤。

01实验室仪器

XR-3TB平台跳台实验分析系统,由上海欣软信息科技有限公司研发,用不透明的深灰色塑料分为5个房间,每个房间mm×mm×mm,电网电压V,电流0.05~2.0ma,每个房间右后角安装一个绝缘平台(高4.5cm),作为动物避免触电的安全平台。

02测试策略protocol

实验前三天,小白鼠熟悉实验室环境,自由饮食,每天9:00-12:00进行实验。保持实验室安静。将实验室温度保持在25℃。将各组小鼠放入反应箱中适应3分钟,然后施加0.25mA交流电流。受到电击后,老鼠会寻找跳台来躲避电击。记录各组从触电到跳台的时间(记为跳台时间)和5分钟内跳台的错误次数(记为基本错误次数)。之后分别在24小时、48小时、72小时、96小时、小时、小时和小时对T1~T7小鼠进行测试,记录小鼠第一次跳台的时间(潜伏期)和3分钟内跳台的次数(错误次数)。如果小鼠在平台上停留时间超过5分钟,则潜伏期为5分钟。记录并比较不同组小鼠记忆成绩的差异。

03测试结果

各组小鼠训练时跳上时间和基础错误次数差异无显著性(P0.05),表明各组小鼠基础智力相似。训练后T1组、T2组和T3组各组的错误次数和潜伏期差异无显著性;T4组的潜伏期缩短、错误次数增多(P0.05),表明小鼠在训练后第96h记忆成绩下降;T5组、T6组和T7组与T4组相比,潜伏期略有缩短、错误次数增多,但差异无显著性(P0.05);T5组、T6组和T7组分别与T1、T2、T3组相比,差异有显著性(P0.05)。

04摘要

跳台试验是评价药物对学习记忆影响最常用的动物模型。实验前,为了平衡群体,往往需要测量生物的智力。根据记忆形成的特点,如果经常反复刺激强化记忆,会导致以后的测试出现错误。所以实验动物自然遗忘后再进行正式实验更合理。对这一时间的测量表明,小鼠自然遗忘的时间为首次电刺激后4天,提示在随机分层分组后4天进行实际测试更为合适。

记忆的过程分为记忆的获得、巩固和提取,而这三个过程是有顺序的,即先记忆获得,再巩固,最后再现。评估药物对记忆巩固效果的实验的模式是先训练小鼠,再给药,24小时后再测试。如果小鼠潜伏期缩短,错误次数增多(与阴性对照组相比,下同),可以认为该药物对小鼠记忆的巩固有作用。但当需要评价药物对小鼠学习是否有长期影响时,如何科学地进行实验?根据记忆形成的特点,当小鼠被反复置于同一环境中,受到多次电刺激时,无疑会加强记忆的巩固。

在实验中,如果小鼠出现记忆巩固的行为表现,可以推断小鼠的记忆获得能力得到恢复,具有24小时保持记忆的能力。但如果在相同的间隔(一般为24小时)进行跳跃实验,如果潜伏期延长,错误次数减少,只能说明小鼠能保持24小时的记忆巩固,而不能说明它有长时间的记忆巩固(因为记忆获取能力已经存在)。为了消除这种影响因素,确定一个合适的区间,需要准确评估药物对记忆巩固的影响。电刺激后小鼠自然遗忘时间的测定可以为确定这一区间提供依据。我们认为应该在小鼠第一次记忆巩固行为后3天左右对其进行测试,以此来发现药物使用后是否存在长期记忆巩固损伤。记忆再现的实验也是如此。

如果你也对动物跳台实验感兴趣,或者对跳台实验还有疑问,可以



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